Prática 3

Práctica 3: Análisis bioquímico de los principios inmediatos de la leche 

• Materiales:
• Tubos de ensayo
• Pinzas
• Pipeta
• Pipeteador automático 
• Gradilla 
• Marcador de vidrio
• Agua 
• Leche
• Reactivo de Fehling A
• Reactivo de Fehling B
• Mechero
• Alcohol metílico
• Papel secante
• Sosa caustica 
• Reactivo de Sudan III
• Reactivo de Biuret
• Cuentagotas
• Metodología:
• Reacción de Fehling: reacción para determinar azúcares reductores.
• Primero introducimos en un tubo de ensayo con ayuda de una pipeta 5 ml de agua.
• Añadimos en el tubo 2 ml de Fehling A y B.
• Lo agitamos suavemente y lo calentamos con el mechero. 
• Finalmente observamos la reacción negativa a azúcares reductores.
• Hacemos exactamente el mismo procedimiento con la leche en un tubo de ensayo distinto y comparamos los resultados.
• Reacción de Biuret: detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y compuestos con enlaces peptídicos. 
• Con un pipeta introducimos en un tubo de ensayo 5 ml de agua.
• Procedemos a echar 2 ml de reactivo de Fehling A.
• Agitamos y observamos la reacción negativa nuevamente.
• Hacemos lo mismo con la leche y comparamos resultados.
• Reacción de Sudán III: detectar grasas. Insoluble en agua y liposoluble.
• Volvemos a pipetear en un tubo de ensayo 5 ml de agua
• Añadimos 3 gotas de Sudan III con ayuda de un cuentagotas y observamos la reacción negativa.
• Por último, realizamos lo mismo con la leche y comparamos resultados.
• Resultados:
• Reacción de Fehling:
• Agua      
• Leche     
• Reacción de Biuret:
• Agua               
• Leche              
• Reacción de Sudán III: 
• Agua          
• Leche         

• Conclusiones:
• Reacción de Fehling: En el agua podemos observar como el color es un azul oscuro intenso, ya que da negativo por no tener azucares reductores. En cambio en la leche, después de haberla calentado, si da positivo (marrón) ya que detecta los monosacáridos (glucosa y galactosa) y disacáridos (lactosa) de la leche.
• Reacción de Biuret: Volvemos a ver como en el agua da negativo (azul muy claro), ya que carece de sustancias proteicas y en la leche sí (morado, violeta), ya que es un alimento que aporta proteínas (lactoalbúmina). 
• Reacción de Sudan III: El agua vuelve a dar negativo , ya que no contiene grasas (dorado) y la leche sí (beis), ya que posee ácidos grasos como el oleico. 

Imágenes: fotos hechas en las prácticas en el laboratorio.